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您的位置: 網站首頁 >> 產品中心 >> PCR試劑盒 >> 熒光PCR試劑盒 > 新疆出血熱病毒(XHFV)熒光PCR檢測試劑盒
產品名稱:

新疆出血熱病毒(XHFV)熒光PCR檢測試劑盒

產品型號: 產品時間: 2023-03-08
新疆出血熱病毒(XHFV)熒光PCR檢測試劑盒適用于檢測的疑似感染病人的靜脈血等標本中新疆出血熱病毒 RNA,適用于新疆出血熱病毒感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。
本試劑盒用一對新疆出血熱病毒特異性引物,結合一條特異性熒光探針,用一步法熒光 RT-PCR 技術對新疆出血熱病毒 RNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對可疑感染者的病原學診斷。

產品概述

新疆出血熱病毒(XHFV)熒光PCR檢測試劑盒說明書

【產品名稱】

商品名稱:新疆出血熱病毒(XHFV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR 熒光探針法)

Name :Diagnostic Kit for Xinjiang Hemorrhagic Fever Virus RNA (RT-PCR Fluorescence Probing)

【包裝規格】48 份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于檢測的疑似感染病人的靜脈血等標本中新疆出血熱病毒 RNA,

適用于新疆出血熱病毒感染的輔助診斷。其檢測結果僅供參考。

【檢驗原理】

本試劑盒用一對新疆出血熱病毒特異性引物,結合一條特異性熒光探針,用一

步法熒光 RT-PCR 技術對新疆出血熱病毒 RNA 進行體外擴增檢測,用于臨床上對

可疑感染者的病原學診斷。

【試劑組成】

名 稱 規 格

酶液 50μl×1 管

XHFV 反應液 1.0ml×1 管

XHFV 陽性質控品 50μl ×1 管

陰性質控品 250μl ×1 管

說明:不同批號的試劑盒組分不可交互使用。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運輸、反復凍融少于 5 次,

有效期 12 個月。

【適用儀器】

ABI 7300、7500、ABI stepone / stepone plus 、安捷倫 MX3000P/3005P、MJ

Opticon2 等其他熒光定量 PCR 檢測儀。

【標本采集】

疑似感染病人的靜脈血 2mL 至 EDTA-2Na 抗凝管。

【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70℃,但不能超過 6 個月,標

本運送應采用 2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融。

【使用方法】

1. 樣品處理(樣本處理區)

1.1樣本前處理

按 RNA 提取試劑盒說明書進行提取。

1.2RNA 提取

推薦采用上海晅科生物科技有限公司生產的 RNA 提取試劑盒(離心柱提取

法),請按照試劑盒說明書進行操作。

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2. 試劑配制(試劑準備區)

根據待檢測樣本總數,設所需要的 PCR 反應管管數為 N(N=樣本數+1 管陰性

對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,多配制 1 份),每測試反應體系配制如下表:

試劑 XHFV 反應液 酶液

用量 20μl 1μl

3. 加樣(樣本處理區)

將步驟 1 提取的 RNA、陽性質控品、陰性質控品各取 4μl,分別加入相應的反

應管中,蓋好管蓋,混勻,短暫離心。

4. PCR 擴增(核酸擴增區)

4.1將待檢測反應管置于熒光定量 PCR 儀反應槽內;

4.2設置好通道、樣品信息,反應體系設置為 25ul;熒光通道選擇:

檢測通道(Reporter Dye)FAM, 淬滅通道(Quencher Dye)NONE,請勿

選擇 ROX 參比熒光。

4.3推薦循環參數設置:

步驟 循環數 溫度 時間 收集熒光信號

1 1cycle 42℃ 20min 否

2 1 cycle 95℃ 10min 否

3 40 cycle

94℃ 15sec 否

55℃ 30sec 是

5. 結果分析判定

5.1結果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機器自動分析的結果分析,當曲

線出現整體傾斜時,根據分析后圖像調節 Baseline 的 start 值(一般可在 3~15

范圍內調節)、stop 值(一般可在 5~20 范圍內調節),以及 Threshold 的 Value

值(上下拖動閾值線至高于陰性對照),重新分析結果。

5.2結果判斷

陽性:檢測通道 Ct 值≤35.0,且曲線有明顯的指數增長曲線;

可疑:檢測通道 35.0<Ct 值≤37,建議重復檢測,如果檢測通道仍為 35.0<Ct

值≤37,且曲線有明顯的增長曲線,判定為陽性,否則為陰性;

陰性:樣本檢測結果 Ct 值>37 或無 Ct 值。

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7. 質控標準

陰性質控品:無明顯擴增曲線或無 Ct 值顯示;

陽性質控品:擴增曲線有明顯指數生長期,且 Ct 值≤32;

以上條件應同時滿足,否則實驗視為無效。

8. 產品性能指標

陰陽性參考品符合率:5 份陽性參考品符合率為 100%;10 份陰性參考品符合率

為 100%。

低檢測限:5.0×102copies/ml。

精密度:批內、批間精密度檢測 Ct 值的變異系數(CV)均小于等于 3%。

 

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