禽流感抗體ELISA檢測試劑盒使用說明書

【試驗原理】

雞新城疫是由新城疫病毒NDV引起的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。本病主要特征是呼吸困難、嚴重下痢、粘膜和漿膜出血，病程稍長的伴有神經(jīng)癥狀。雞感染后，體內(nèi)會產(chǎn)生特異性抗體。檢測抗新城疫病毒抗體可作為該病疫苗免疫狀況及該病輔助檢測指標。
新城疫抗體檢測試劑盒采用方法檢測雞血清中的特異性抗新城疫病毒抗體。本試劑靈敏度高，特異性強，重復性好，操作方便快速，可分多次使用。?

【主要組成成份】

【儲存條件及有效期】

1.     2~8℃避光保存，防止冷凍，有效期為12個月。

2.     包被板開封后2~8℃避光保存，使用期限為15天。

【適用儀器】

含450nm和630nm波長酶標儀；37℃恒溫設(shè)備；可調(diào)微量移液器。

【樣本要求】

1.     為取得Z佳實驗效果，避免使用含疊氮鈉、高血脂、長菌以及嚴重溶血的樣品；

2.     短期（7天）將進行檢測的血清樣品可存放于2～8℃；如需長期保存，應(yīng)置于-20℃或以下，避免反復凍融。

【檢驗方法】

1.      洗滌液配制：用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號液）按1：10稀釋（如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水），充分混勻即為工作洗滌液。

2.      樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:100稀釋（如5μl血清＋495μl樣本稀釋液），充分混勻。 陰性、陽性對照品不用稀釋，直接加樣。

3.      加樣反應(yīng)：每次試驗設(shè)陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔（分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100μl）。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100μl。37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘；后一次甩凈，拍干。

4.       加酶反應(yīng)：除空白對照孔外，其余每孔加酶結(jié)合物（1號液）1滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

5.        顯色反應(yīng)：加底物（3號液）和顯色劑（4號液）各1滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。

6.        終止反應(yīng)： 加終止液（6號液）1滴，以空白對照調(diào)零，用酶標儀于450nm波長（630nm作為參比波長）讀取OD值。

【參考值】

1.     Cut-off 值 (COV)=陰性對照平均OD值×2.1 (陰性對照孔OD值＜0.08時按0.08計)。

2.     有效性判定：

空白對照孔OD值＜0.05（若大于0.05則實驗無效）；

陰性對照孔OD值≤0.10（若大于0.10則實驗無效）；

陽性對照孔OD值≥0.30（若小于0.30則實驗無效）。

【檢驗結(jié)果的解釋】

樣本OD值≥COV值時，判為禽流感病毒抗體陽性；

樣本OD值＜COV值時，判為禽流感病毒抗體陰性。                        

【檢驗方法的局限性】本試劑僅適用于檢測鴨血清。

【注意事項】

1.     包被板須密封防潮。從冷藏環(huán)境中取出時，應(yīng)平衡至室溫后，方可開封啟用。未使用完的板條應(yīng)即時放回有干燥劑的自封袋中，4℃密封保存。

2.     滴加試劑前應(yīng)將滴瓶輕搖、混勻，首滴棄去；滴加試劑時瓶身應(yīng)保持豎直。

3.     瓶蓋每次使用后要蓋緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。

4.     孵育時，推薦使用水浴箱。如無水浴箱，可取密封濕盒放入37℃溫箱內(nèi)使用。

5.     用棄的試劑盒及樣本都應(yīng)按污染物妥善處理。試劑盒內(nèi)終止液有腐蝕性，須小心使用。

公司優(yōu)勢：
1）質(zhì)量：我司提供的的試劑均經(jīng)過出廠檢測。不對可退換
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