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基礎細胞培養基的組成及其選擇說明

更新日期: 2021-10-25
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  基礎細胞培養基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM 、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質。人工合成培養基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。
 
  組成及作用:
 
  氨基酸:組成蛋白質的基本單位。不同的細胞對氨基酸的需求各異,但幾種必需氨基酸細胞自身不能合成,必須依靠培養液提供,如組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、色氨酸、纈氨酸、半胱氨酸、酪氨酸等。其余非必需氨基酸,細胞可以自己合成,或通過轉氨作用由其他物質轉化而來。絕大部分細胞對谷氨酰胺有較高的要求,因為谷氨酰胺是作為能源
 
  及碳源物質同時被細胞利用,是是細胞合成核酸和蛋白質必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細胞生長不良而死亡,所以各種培養液中都含有較多的谷氨酰胺。細胞所能利用的氨基酸是L型同分異構體,D型氨基酸不能被利用。
 
  維生素:維持細胞生長的一種生物活性物質,對細胞代謝有重大作用。它們在細胞中大多形成酶的輔基或輔酶,沒有它們,酶便沒有活性,代謝活動將無法進行。維生素分為水溶和脂溶兩大類,的培養液中直接采用ATP和輔酶A。
 
  葡萄糖:大部分培養基都以葡萄糖作為能量來源之一。
 
  無機鹽:維持培養基滲透壓平衡,參與細胞的代謝活動。主要有Na+、K+、Ca2+、Mg2+等。Na+是細胞外液中主要的陽離子,對維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細胞內液,細胞內K+對于激活某些酶是必需的,并在調節細胞內環境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細胞外液中的作用是將組織內部細胞之間相互粘著,在細胞內參與許多重要的細胞生理活動,如傳導、參與肌肉細胞收縮等。在懸浮培養時,為了減少細胞的聚集和附著,要減少Ca2+的濃度。Mg2+是構成細胞間質的重要成分,對于細胞間相互穩定結合有很重要的意義。磷的化合物對細胞物質代謝和生理功能調控有重要作用。
 
  其他成分:肽、核苷、嘌呤等??蓭椭毎目寺』囵B及維持某些特殊細胞系的生長。
 
  基礎細胞培養基選擇:
 
  1. 建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞培養基??梢圆殚唴⒖嘉墨I,或在購買細胞株時咨詢。
 
  2. 其它實驗室慣用的培養基不妨一試,許多培養基可以適合多種細胞。
 
  3. 根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基。
 
  4. 用多種培養基培養目的細胞,觀察其生長狀態,可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷,根據實驗結果選擇培養基,這是客觀的方法,但比較繁瑣。
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